The performance of laboratory tests in the management of a large outbreak of orally transmitted Chagas disease

Orally transmitted Chagas disease (ChD), which is a well-known entity in the Brazilian Amazon Region, was first documented in Venezuela in December 2007, when 103 people attending an urban public school in Caracas became infected by ingesting juice that was contaminated with Trypanosoma cruzi. The infection occurred 45-50 days prior to the initiation of the sampling performed in the current study. Parasitological methods were used to diagnose the first nine symptomatic patients; T. cruzi was found in all of them. However, because this outbreak was managed as a sudden emergency during Christmas time, we needed to rapidly evaluate 1,000 people at risk, so we decided to use conventional serology to detect specific IgM and IgG antibodies via ELISA as well as indirect haemagglutination, which produced positive test results for 9.1%, 11.9% and 9.9% of the individuals tested, respectively. In other more restricted patient groups, polymerase chain reaction (PCR) provided more sensitive results (80.4%) than blood cultures (16.2%) and animal inoculations (11.6%). Although the classical diagnosis of acute ChD is mainly based on parasitological findings, highly sensitive and specific serological techniques can provide rapid results during large and severe outbreaks, as described herein. The use of these serological techniques allows prompt treatment of all individuals suspected of being infected, resulting in reduced rates of morbidity and mortality.

A combined proteomic and immunologic approach for the analysis of Schistosoma mansoni cercariae and adult worm protein extracts and the detection of one of the vaccine candidates, Sm28GST, from a Venezuelan parasite isolate / Aproximación al análisis proteómico e inmunológico de extractos proteicos de cercaria y verme adulto de Schistosoma mansoni y detección de uno de los candidatos a vacuna, Sm28GST, de un aislado venezolano

Understanding the mode of Schistosoma mansoni larval invasion and the mechanism of immune evasion utilized by larvae and adult worms is essential for a rational development of vaccines or drugs to prevent or cure the disease. This parasite has a very complex molecular organization in all parasite stages, and identifying the major parasite proteins would give clues to schistosome metabolism and to the interaction of the parasite with the host immune system. Our goal was the evaluation of the protein parasite repertoire using a proteomic approach, and the characterization of protein extracts from two different parasite stages of a Venezuelan isolate, such as cercariae and adult worms, previously performed by other authors in some other strains. A comparison among authors was made. Besides, we aimed to identify different isoforms of one of the vaccine candidates, the gluthation-S-transferase protein (Sm28GST), by 2D SDS-PAGE and mass spectrometry, and to achieve its immunologic detection using sera from rabbits immunized with synthetic peptides derived from the Sm28GST protein. These techniques allowed the identification of some of the target molecules of the protective immune response that are being evaluated as potential members of a multi-component and multi-stage anti-S. mansoni vaccine and to clarify if the selected peptides induce antibodies that are able to recognize different isoforms of the Sm28GST.

Es esencial comprender la forma como las larvas de Schistosoma mansoni invaden y los mecanismos de evasión inmune utilizados por larvas y adultos, para el desarrollo racional de vacunas o drogas para prevenir o curar la esquistosomiasis. Este parásito tiene una organización molecular muy compleja en todos sus estadíos, por lo que la identificación de las proteínas más importantes es clave para investigar el metabolismo del esquistosoma y la interacción del parásito con el sistema inmune del hospedero. El objetivo de este trabajo fue evaluar el repertorio proteico del parásito utilizando una aproximación proteómica y la caracterización de extractos proteicos de dos estadios parasitarios diferentes de un aislado venezolano, como la cercaria y el verme adulto, previamente realizado por otros autores en otras aislados. Se realizó una comparación entre autores. Además, se identificaron diferentes isoformas de uno de los candidatos a vacuna, la glutation S transferasa (Sm28GST) por 2D SDS-PAGE y espectrometría de masas y se logró su detección inmunológica, usando sueros de conejos inmunizados con péptidos sintéticos derivados de la proteína Sm28GST. Estas técnicas permitieron identificar algunas de las moléculas blanco de la respuesta inmune protectora que están siendo evaluados como miembros potenciales de una vacuna multi-estadio y multi-componente y aclarar si los péptidos seleccionados indujeron anticuerpos capaces de reconocer diferentes isoformas de la Sm28GST.

Low transmission areas of schistosomiasis in Venezuela: consequences on the diagnosis, treatment, and control

Schistosomiasis low transmission areas as Venezuela, can be defined as those where the vector exists, the prevalence of active cases is under 25 percent, individuals with mild intensity of infection predominate and are mostly asymptomatic. These areas are the consequence of effective control programs, however, "silent" epidemiological places are difficult to trace, avoiding the opportune diagnosis and treatment of infected persons. Clinic and abdominal ultrasound have not shown to discriminate infected from uninfected persons in areas where besides Schistosoma mansoni, intestinal parasites are the rule. Under these conditions, serology remains as a very valuable diagnostic tool, since it gives a closer approximation to the true prevalence. In this sense, circumoval precipitin test, ELISA-SEA with sodium metaperiodate, and alkaline phosphatase immunoassay joined to coprology allow the identification of the "schistosomiasis cases". In relation to public health, schistosomiasis has been underestimated by the sanitary authorities and the investment on its control is being transferred to other diseases of major social and political relevance neglecting sanitary efforts and allowing growth of snail population. Some strategies of diagnosis and control should be done before schistosomiasis reemergence occurs in low transmission areas.

Prevalencia de las parasitosis intestinales y esquistosomosis en comunidades de área centro norte de Venezuela / Prevalence of the intestinal parasite and schistosomiasis in communinities of the center-north area of Venezuela

Con el fin de evaluar las prevalencias de parásitos intestinales y los casos de esquistosomosis, se estudiaron seis comunidades ertenecientes a tres Estados, Aragua, Carabobo y Vargas, del centronorte de Venezuela. Se evaluaron 1603 personas por varios exámenes coprológicos para el diagnóstico de helmintos y protozoarios y 2175 personas para descartar esquistosomosis, en 1532 de los cuales se practicaron exámenes coprológicos y serológicos simultáneamente. Los helmmintos más frecuentes en las comunidades estudiadas fueron: Trichuris trichiura (29,63 por ciento) y Ascaris lumbricoides (12,91 por ciento). Entre los protosuarios destacaron, Entamoeba coli (12,41 por ciento), Blastocystis hominis (12,10 por ciento), Endolimax nana (9,85) y Giardia duodenalis (9,35 por ciento). Se diagnosticaron 251 casos de esquistosomosis, resultando una prevalencia de 11,5 por ciento. El rango de eliminación de huevos de Schistosoma mansoni fue de 24 a 1928 huevos/gramo de heces, siendo el 71 por ciento de las personas con leve intensidad de infección. En dos localidades del Estado Carabobo, Belén y Barrio José Leonardo Chirinos, se encontraron casos con eliminación de huevos en las heces en personas menores de 30 años. Los estudios de prevalencias de parasitosis intestinales y los trabajos de campo basados en coprología y serología para esquistosomosis, deben ser la base del Programa de Control para la vigilancia epidemiológica de estas entidades

Péptidos sintéticos para el diagnóstico y vigilancia epidemiológica en esquistosomosis mansoni / Synthetics peptides for the diagnose and vigilance epidemiologic in schitosomiasis mansoni

El diagnóstico de laboratorio de la esquistosomosis es uno de los problemas por resolver, especialmente en áreas de bajas cargas parasitarias, como Venezuela, además de ser también una de las limitantes la evaluación de las nuevas vacunas contra esta parasitosis. Por esta razón, nos planteamos desarrollar métodos de inmunodiagnóstico basados en la detección de anticuerpos y de antígenos circulantes utilizando la estrategia de la síntesis química, para elaborar péptidos derivados de la captesina B (Sm31) y la asparraginil endopeptidasa (Sm32). Tres de los péptidos de la Sm31 fueron reconocidos al menos por el 49 por ciento de los pacientes y de ellos el IMT-180, lo fue por el 86 por ciento, exhibiendo además una alta especificidad (100 por cierto). Dos de los péptidos de la Sm31 y 3 de la Sm32 indujeron en conejos, el reconocimiento de las respectivas moléculas, inclusive en cortes histológicos. Resultados preliminares de inmunoensayos de captura anti-Sm32 han revelado una baja sensibilidad

Desprendimiento de calor en los sistemas rotatorios Profile(R), Kavo 29 CH(R) y la técnica manual mecánica crown-down: estudio in vitro / Heat release in the Profile(R) and Kavo 29 CH(R) rotary systems and in the crown-down manual mechanical technique: an in vitro study

Propósito: el propósito del presente estudio in vitro fue medir el aumento de la temperatura en la superficie externa radicular de premolares extraídos, a 1 y 6 mm del ápice, ocurrido durante la preparación biomecánica del conducto radicular, utilizando termocuplas, con dos sistemas rotatorios (Profile(R), Kavo 29 CH(R)) y la técnica mecánica manual crown-down. Métodos: 78 especímenes se decoronaron a 16 mm y se montaron en una olla Hanau(R), simulando el medio bucal, a una temperatura constante de 37§C. Cada instrumento fue utilizado 30 segundos dentro del conducto y los cambios de temperatura se midieron empleando dos termocuplas tipo K adosadas a la cara mesial de los dientes a 1 y 6 mm del ápice. Resultados: el mayor desprendimiento de calor fue obtenido por la técnica manual mecánica crown-down, seguido por el sistema Kavo 29CH(R). El menor desprendimiento de calor se obtuvo empleando el sistema Profile(R). Para los tres sistemas, el mayor desprendimiento de calor se obtuvo con los dos primeros instrumentos y el incremento no fue mayor a 5§C. Conclusiones: los resultados de esta investigación sugieren que el aumento de temperatura en la superficie externa radicular no tiene efectos sobre los tejidos adyacentes al diente